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Las plántulas de cańa de azúcar (Saccharum sp. híbrido) var. C91-301 micropropagadas en biorreactores de inmersión temporal (BIT) sirvieron como material vegetal con el objetivo de incrementar la eficiencia biológica y estudiar los cambios fisiológicos, histológicos y bioquímicos durante la fase de aclimatización. Se estudió la influencia de la calidad de las mismas en el momento de salida de la fase in vitro, diferentes sustratos e intensidades lumínicas (flujo de fotones fotosintéticos) sobre la supervivencia y el crecimiento. También se evaluó el contenido de clorofilas a y b, el desarrollo de los haces fibrovasculares, el comportamiento endógeno de la sacarosa, las enzimas involucradas en el metabolismo del carbono y la capacidad fotosintética durante todo el proceso. Los mejores porcentajes de supervivencia (90%) se lograron con las categorías de plántulas con masa fresca superior a 0,31 g, plantadas en turba a 600 micromol m-2s-1 y 90% humedad relativa (HR). La actividad fotosintética se incrementó desde su salida de las condiciones in vitro, lo que está en correspondencia con el desarrollo fisiológico e histológico alcanzado por las plántulas, mientras que la transpiración